珈創(chuàng)生物 —— 生物技術(shù)服務(wù)與研發(fā)為一體的高新技術(shù)企業(yè)
優(yōu)質(zhì)高效透明
High quality, efficient and transparent
發(fā)布時(shí)間：2022-12-05 16:32 信息來源： 閱讀次數(shù)： 次
來源于人或動(dòng)物細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的一個(gè)共同特點(diǎn)是存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)，污染可來自原細(xì)胞系（細(xì)胞基質(zhì)）本身，也可來自生產(chǎn)過程中偶然帶入的外源病毒，這種污染可能產(chǎn)生嚴(yán)重的臨床后果。
風(fēng)險(xiǎn)控制原則
控制生物技術(shù)產(chǎn)品的潛在病毒污染，可歸納為以下三條相互補(bǔ)充的原則：
a）選擇并對(duì)選定的細(xì)胞系和其他原料進(jìn)行檢定，確保其不含可能對(duì)人有感染和/或致病作用的病毒。
b）評(píng)估生產(chǎn)工藝清除感染性病毒的能力。
c）檢測(cè)生產(chǎn)適當(dāng)步驟的產(chǎn)品，確保產(chǎn)品未受感染性病毒的污染。
各級(jí)細(xì)胞病毒安全性控制
細(xì)胞庫包括原始細(xì)胞庫（PCB，又稱細(xì)胞種子）、主細(xì)胞庫（MCB）和工作細(xì)胞庫（WCB）。
ICH Q5A（R1）及USP-NF<1050>中對(duì)不同級(jí)別細(xì)胞進(jìn)行病毒檢測(cè)的建議：
a.作為藥物生產(chǎn)起始細(xì)胞基質(zhì)的工作細(xì)胞庫，必須進(jìn)行外源病毒檢測(cè)，既可對(duì)WCB進(jìn)行直接測(cè)定，也可對(duì)從WCB來源的體外傳代限度內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行分析。
b. 達(dá)到限傳代次的細(xì)胞：在體外達(dá)到傳代限度的生產(chǎn)細(xì)胞。
c. 也可測(cè)定其他因子。
d. 若逆轉(zhuǎn)錄病毒感染試驗(yàn)為陽性，則無須檢測(cè)。
e. 指使用于已受此因子感染的細(xì)胞系。
f. 對(duì)第一個(gè)WCB，此測(cè)試應(yīng)在該WCB產(chǎn)生的達(dá)到體外限傳代次細(xì)胞上進(jìn)行；以后的WCB，可直接在WCB上進(jìn)行單項(xiàng)體外和體內(nèi)測(cè)試，或在達(dá)到體外限傳代次的細(xì)胞上測(cè)試。
g. 例如，MAP、RAP、HAP-通常適用于嚙齒細(xì)胞系。
h. 例如，適用于人、非人靈長(zhǎng)目或其他細(xì)胞的測(cè)試方法。
EP10.0 <5.2.3>中對(duì)不同級(jí)別細(xì)胞系進(jìn)行病毒檢測(cè)的建議：
中國藥典三部（2020版）對(duì)細(xì)胞基質(zhì)及細(xì)胞庫體系的病毒檢查的建議：
通過以上法規(guī)要求可以看出，對(duì)于細(xì)胞基質(zhì)和各級(jí)細(xì)胞庫，具體的檢定項(xiàng)目需要根據(jù)特定的細(xì)胞特性、傳代歷史、培養(yǎng)過程、生產(chǎn)工藝等進(jìn)行綜合評(píng)估。根據(jù)ICH Q5A的要求，應(yīng)對(duì)MCB進(jìn)行內(nèi)源性和非內(nèi)源性病毒污染的檢測(cè)；如果不檢測(cè)MCB，也可以使用WCB全面檢測(cè)進(jìn)行替代。
生產(chǎn)過程中感染性病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)控制
雖然在細(xì)胞庫階段對(duì)MCB 和WCB 進(jìn)行了內(nèi)外源病毒因子檢測(cè)，但有些內(nèi)源性病毒可能在MCB 和WCB 階段未被檢出，或者在生產(chǎn)過程中引入偶然的病毒因子污染，因而對(duì)生產(chǎn)終末細(xì)胞和/或細(xì)胞收獲液中的病毒因子進(jìn)行檢測(cè)和控制非常重要。
對(duì)于UPB樣品，ICH Q5A僅要求在進(jìn)行上市注冊(cè)申請(qǐng)時(shí)，至少應(yīng)上報(bào)三批試生產(chǎn)或規(guī)?；a(chǎn)的UPB研究資料，一般使用一種或幾種細(xì)胞系進(jìn)行體外篩查試驗(yàn)。如適用，可使用PCR試驗(yàn)或其他適當(dāng)?shù)姆椒āMA文件《Guideline on Virus Safety Evaluation of Biotechnological Investigational Products》則指出，每一批用于臨床試驗(yàn)的UPB均應(yīng)按照ICH Q5A的要求進(jìn)行檢測(cè)，具體不同細(xì)胞系對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法也有不同。
①如果可能，檢測(cè)樣品應(yīng)包括細(xì)胞或細(xì)胞碎片以進(jìn)行細(xì)胞相關(guān)病毒檢測(cè)。對(duì)于灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，生產(chǎn)商應(yīng)確定并證明最適合的樣品（含細(xì)胞的樣品）收集步驟，收集超出批量生產(chǎn)代次的細(xì)胞檢測(cè)樣品也是可行的；在上述情況下，應(yīng)證明采用分析方法的合理性；如果已有敏感度更高的方法可表明感染逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)結(jié)果為陰性，則感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒的檢測(cè)可忽略。②僅需在研發(fā)的特定階段對(duì)前三批原液進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒的檢測(cè)（如果制備批次不足三批，也可用更少批次）。
FDA指導(dǎo)文件《Points to Consider in the Manufacture and Testing of Monoclonal Antibody Products for Human Use》中則對(duì)UPB、純化中間品和成品的病毒檢測(cè)都有不同要求。對(duì)于每個(gè)批次收獲液需要進(jìn)行外源病毒因子、種屬特異性病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒定量的檢測(cè)。
根據(jù)中國藥典三部（2020版）要求對(duì)于人用生物制品生產(chǎn)用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)及檢定用動(dòng)物細(xì)胞，需要對(duì)MCB進(jìn)行全面檢定，并且需要對(duì)EOPC進(jìn)行檢定。對(duì)于人用重組單克隆抗體制品生產(chǎn)，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)過程及所用材料的特點(diǎn)，在合適的階段進(jìn)行常規(guī)或特定的外源病毒污染檢查。除另有規(guī)定外，應(yīng)對(duì)限定細(xì)胞傳代次數(shù)的生產(chǎn)方式，采用適當(dāng)?shù)捏w外方法至少對(duì)3次收獲物進(jìn)行外源病毒檢測(cè)。
相關(guān)法規(guī)指導(dǎo)
近年來，雖然對(duì)于內(nèi)外源病毒因子檢測(cè)中外申報(bào)要求各異，但2020年1月NMPA發(fā)布的“國家藥監(jiān)局關(guān)于適用《Q2（R1）：分析方法論證：正文和方法學(xué)》等11個(gè)國際人用藥品注冊(cè)技術(shù)協(xié)調(diào)會(huì)指導(dǎo)原則的公告（2020年第7號(hào)）”中包含ICH Q5A（R1）和Q5B等文件，這表明國內(nèi)法規(guī)正逐漸與國際相關(guān)法規(guī)接軌，給國內(nèi)制藥企業(yè)進(jìn)行中外雙報(bào)帶來了便利，從而加速藥品上市。
后臺(tái)回復(fù)“病毒檢測(cè)指導(dǎo)”，獲取相關(guān)指導(dǎo)文件。
武漢珈創(chuàng)生物相關(guān)服務(wù)
武漢珈創(chuàng)生物技術(shù)股份有限公司，創(chuàng)建于2011年，是一家集生物技術(shù)服務(wù)與研發(fā)為一體的高新技術(shù)企業(yè)，專注于為生物藥品/制品的生產(chǎn)企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供各類細(xì)胞（含重組細(xì)胞、干細(xì)胞、免疫細(xì)胞等）及原輔料的質(zhì)量檢測(cè)、病毒清除工藝驗(yàn)證技術(shù)服務(wù)。
質(zhì)量檢測(cè)服務(wù)
武漢珈創(chuàng)生物可按相關(guān)法規(guī)或指導(dǎo)原則提供各類細(xì)胞基質(zhì)的成瘤性檢查服務(wù)，且有多種檢測(cè)方法可供選擇如動(dòng)物體內(nèi)接種法（裸鼠）、軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)、端粒酶活性檢測(cè)等，至今已完成數(shù)萬批次的細(xì)胞及產(chǎn)品檢測(cè)服務(wù)。
定制化服務(wù)
針對(duì)特殊需求，我們還可提供定制化的檢測(cè)服務(wù)，歡迎新老客戶前來咨詢。
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